FCS纳米颗粒表征与分子互作分析仪(DEMO) FCS Nanoparticle Characterization and Molecular Interaction Analyzer
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收费标准
机时200元/小时 -
设备型号
SX300 -
当前状态
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管理员
刘冰如 18800302621 -
放置地点
卫光生命科学园1A栋三层305
- 仪器信息
- 预约资源
- 检测项目
- 附件下载
- 公告
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名称
FCS纳米颗粒表征与分子互作分析仪(DEMO) FCS Nanoparticle Characterization and Molecular Interaction Analyzer
资产编号
202506230101
型号
SX300
规格
桌面式
产地
中国
厂家
广东中科奥辉科技有限公司
所属品牌
出产日期
购买日期
所属单位
样品制备与分析平台
使用性质
科研
所属分类
资产负责人
潘孝敬(注销)
联系电话
联系邮箱
放置地点
卫光生命科学园1A栋三层305
- 主要规格&技术指标
- 主要功能及特色
- 样本检测注意事项
主要规格&技术指标
1、共聚焦激发和检测体积:≈1fL
2、激光器:CW激光器3路(波长488nm、561nm、638nm),输出功率连续可调、最大输出功率≥20mW
3、探测器:双通道光纤耦合雪崩光电二级管,光量子效率≥65%@650nm、死时间≤40ns、暗计数≤100cps、线性探测区间0-10^7 cps
4、物镜:60X NA1.2水介质,工作距离≥0.27mm、可适用于校正0.13-0.21mm厚度盖玻片
5、相关数据卡:可实时输出两个通道的自相关和一个通道的交相关数据,最小相关时间小于1000ns
6、采集软件:一键共聚焦针孔全自动校准,可自定义设置数据采集时间、重复次数、一键启动/停止,支持实时展示荧光光强信号、荧光自相关和交相关衰减曲线;
7、分析软件:内置多个分析模型可供选择,具有分子三维自由扩散分析模型、荧光三重态分析模型、异常扩散模型等。支持分子浓度、分子流体动力学半径、扩散系数等检测计算。可自动或手动设置拟合初值,可一键式数据拟合。
2、激光器:CW激光器3路(波长488nm、561nm、638nm),输出功率连续可调、最大输出功率≥20mW
3、探测器:双通道光纤耦合雪崩光电二级管,光量子效率≥65%@650nm、死时间≤40ns、暗计数≤100cps、线性探测区间0-10^7 cps
4、物镜:60X NA1.2水介质,工作距离≥0.27mm、可适用于校正0.13-0.21mm厚度盖玻片
5、相关数据卡:可实时输出两个通道的自相关和一个通道的交相关数据,最小相关时间小于1000ns
6、采集软件:一键共聚焦针孔全自动校准,可自定义设置数据采集时间、重复次数、一键启动/停止,支持实时展示荧光光强信号、荧光自相关和交相关衰减曲线;
7、分析软件:内置多个分析模型可供选择,具有分子三维自由扩散分析模型、荧光三重态分析模型、异常扩散模型等。支持分子浓度、分子流体动力学半径、扩散系数等检测计算。可自动或手动设置拟合初值,可一键式数据拟合。
主要功能及特色
设备为独立桌面式系统,可在普通实验室桌面环境下应用荧光相关光谱技术(FCS)和荧光交相关光谱(FCCS)和交替激发的荧光共振能量转移分析技术(ALEX smFRET)定量检测溶液样品或细胞裂解液中的分子或纳米颗粒的浓度、分子大小、分子间相互作用、构象变化等特性:
1、分子或纳米颗粒的浓度线性测量范围(Atto488标准):10pM - 100nM
2、分子或纳米颗粒的流体动力学半径检测下限:≤10nm
4、分子相互作用的解离常数(KD)常数测量范围:pM–μM
5、单分子短促荧光信号分析(Burst Analysis),实现ALEX smFRET等功能。
1、分子或纳米颗粒的浓度线性测量范围(Atto488标准):10pM - 100nM
2、分子或纳米颗粒的流体动力学半径检测下限:≤10nm
4、分子相互作用的解离常数(KD)常数测量范围:pM–μM
5、单分子短促荧光信号分析(Burst Analysis),实现ALEX smFRET等功能。
样本检测注意事项
样品准备注意事项:
1、尽量准备新鲜、纯度较高的样品,除自发荧光样品外(如 AIE 材料、量子点等),要求样品通过化学标记(推荐氨基标记)或融合荧光蛋白,且能够被 DEMO 机配备的 488/561/638nm 激光器激发,同时激发后样品的stokes shift 不应过长(应在对应探测器的滤光检测范围内)。需要准备好样品标记的对应染料单独检测做对照(例如:样品标记了 Alexa 647,则需要准备游离的Alexa647 染料),建议浓度 1-100nM、体积 50~100μL 即可;
2、根据实验目的,准备合适分量的样品、buffer,同时可进行适当分装,最好同时准备高浓度和低浓度的样品;
3、样品种类与上样量:可使用均相溶液、细胞裂解液样品,但介质需为水相,且不可使用活细胞样品、或有机溶剂含量过高(>50%)的样品。一般而言, FCS 实验单次上样的体积≥10μL,若采集时间较长,则需要加大上样量,避免样品挥发带来的影响,故一般推荐上样量为 30~100μL;此外,FCS 实验的最佳上样浓度为 1-10nM,若样品光量子效率低,可提高上样浓度,反之,降低上样浓度。
4、缓冲液要求:实验中所需要用到的各种缓冲液的背景信号不宜过高,越干净越好,有条件的情况请使用0.1μm 或 0.22μm 的滤器过滤,且需要满足以下条件:
①缓冲液不应使用已污染或易被污染的 buffer,最好使用商品化的buffer;
②缓冲液中尽量避免加入表面活性剂(如Triton X100 等),若无法避免,则需要控制用量,用量不应超过总反应体系0.5%;
③避免使用会影响溶液粘稠度的试剂,如甘油等。
1、尽量准备新鲜、纯度较高的样品,除自发荧光样品外(如 AIE 材料、量子点等),要求样品通过化学标记(推荐氨基标记)或融合荧光蛋白,且能够被 DEMO 机配备的 488/561/638nm 激光器激发,同时激发后样品的stokes shift 不应过长(应在对应探测器的滤光检测范围内)。需要准备好样品标记的对应染料单独检测做对照(例如:样品标记了 Alexa 647,则需要准备游离的Alexa647 染料),建议浓度 1-100nM、体积 50~100μL 即可;
2、根据实验目的,准备合适分量的样品、buffer,同时可进行适当分装,最好同时准备高浓度和低浓度的样品;
3、样品种类与上样量:可使用均相溶液、细胞裂解液样品,但介质需为水相,且不可使用活细胞样品、或有机溶剂含量过高(>50%)的样品。一般而言, FCS 实验单次上样的体积≥10μL,若采集时间较长,则需要加大上样量,避免样品挥发带来的影响,故一般推荐上样量为 30~100μL;此外,FCS 实验的最佳上样浓度为 1-10nM,若样品光量子效率低,可提高上样浓度,反之,降低上样浓度。
4、缓冲液要求:实验中所需要用到的各种缓冲液的背景信号不宜过高,越干净越好,有条件的情况请使用0.1μm 或 0.22μm 的滤器过滤,且需要满足以下条件:
①缓冲液不应使用已污染或易被污染的 buffer,最好使用商品化的buffer;
②缓冲液中尽量避免加入表面活性剂(如Triton X100 等),若无法避免,则需要控制用量,用量不应超过总反应体系0.5%;
③避免使用会影响溶液粘稠度的试剂,如甘油等。
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